說明 Access RT-PCR System 用于從總RNA 或mRNA 中用逆轉(zhuǎn)錄和PCR 方法擴增特異的目的RNA 序列。這種單管、雙酶系統(tǒng)是一種靈敏、快速、結(jié)果可重復的RNA 分析方法,可用于低豐度RNA。該系統(tǒng)利用來自禽成髓細胞瘤病毒(Avian Myeloblastosis Virus) 的AMV 逆轉(zhuǎn)錄酶(AMV RT) 合成cDNA 第一條鏈,用來自黃色棲熱菌(Thermus flavus ) 的Tfl DNA 聚合酶進行cDNA 第二條鏈的合成及DNA 擴增。Access RT-PCR 系統(tǒng)中優(yōu)化的單一緩沖液系統(tǒng)可非常靈敏地檢測RNA 轉(zhuǎn)錄本,在逆轉(zhuǎn)錄和 PCR 擴增步驟之間不需另外添加緩沖液,簡化了操作步驟,減少了樣品污染的機會。此外,AMV 逆轉(zhuǎn)錄酶在較高溫度下經(jīng)過改良,配合AMV/ Tfl 5 X 反應緩沖液,能減少由于RNA 二級結(jié)構(gòu)引起的問題。 特點 . 實現(xiàn)最大可控性:每一種組分都裝在單獨的管子中,使你能控制每一步反應,優(yōu)化Mg2+ 濃度、建立一個無逆轉(zhuǎn)錄酶的對照反應,等等。 . 使用更少的模板:可使用少至1pg 的總RNA 或mRNA 為模板。 . 不需要增加緩沖液:5X AMV/Tfl 緩沖液可優(yōu)化酶的活力,從而在逆轉(zhuǎn)錄和DNA 擴增步驟之間不需另外添加緩沖液。