說明
   pTARGET™ Mammalian Expression Vector System (pTARGET™ 哺乳動物表達(dá)載體系統(tǒng)) 是一個在哺乳動物細(xì)胞中便于克隆PCR 產(chǎn)物并將其表達(dá)的系統(tǒng)。此載體是通過EcoRV 酶切pTARGETTM 載體，并在兩個3`末端加入胸腺嘧啶構(gòu)建的。插入位點(diǎn)單個3`-T的突出端在兩方面極大提高了PCR 產(chǎn)物與質(zhì)粒連接的效率：第一，3`-T 突出端可以防止載體的自身環(huán)化；第二，為某些熱穩(wěn)定性聚合酶產(chǎn)生的PCR 產(chǎn)物提供一個匹配的突出端。這些聚合酶常常以模板不依賴模式在擴(kuò)增產(chǎn)物的3` 端加上一個脫氧腺苷酸。pTARGET™  載體還包含一段經(jīng)過修飾的β - 半乳糖苷酶的α - 肽編碼區(qū)，從而使重組子也能使用藍(lán)/ 白篩選。
pTARGET™ 載體帶有人巨細(xì)胞病毒(cytomegalovirus, CMV) 即刻早期增強(qiáng)子/ 啟動子區(qū)域，能啟動克隆DNA 的插入片段在哺乳細(xì)胞中組成型表達(dá)。此載體還含有新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因，是哺乳動物細(xì)胞的一個篩選標(biāo)記。pTARGET™  載體使用抗生素G-418 篩選轉(zhuǎn)染細(xì)胞，能用于瞬時表達(dá)或穩(wěn)定表達(dá)。
特點(diǎn)
   . 簡單的PCR 克�。�"T" 突出端允許熱穩(wěn)定性酶( 如Taq DNA 聚合酶) 生成的PCR 產(chǎn)物直接進(jìn)行連接反應(yīng)。
. 強(qiáng)組成型表達(dá)：CMV 增強(qiáng)子/ 啟動子區(qū)域可以在許多細(xì)胞類型中進(jìn)行強(qiáng)組成型表達(dá)。在轉(zhuǎn)基因小鼠中，28 個檢測的組織中有24個能觀察到CMV 增強(qiáng)子/ 啟動子調(diào)控的氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶(chloramphenicol acetyltransferase, CAT) 基因的表達(dá)。此載體在細(xì)胞中以游離體形式表達(dá)SV40 大T 抗原(SV40 largeT antigen)，能獲得更高的表達(dá)水平。
. 藍(lán)/ 白斑篩選：重組子克隆易于篩選。單酶切就能除去插入DNA。
. 穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染子：pTARGET™載體含有新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因，能篩選穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染子。