pGEM® -T 載體系統(tǒng)是克隆PCR 產(chǎn)物的方便系統(tǒng)。pGEM®-T載體是通過EcoRV 酶切pGEM®-5Zf(+) 載體，并在兩個(gè)3`末端加入胸腺嘧啶構(gòu)建的。pGEM®-T 載體插入位點(diǎn)3`-T 突出端可極大提高PCR 產(chǎn)物的連接效率，因?yàn)?`-T突出端可以防止載體的自身環(huán)化，并且為某些熱穩(wěn)定性聚合酶產(chǎn)生的PCR 產(chǎn)物提供一個(gè)匹配堿基。這些聚合酶常常以模板不依賴模式在擴(kuò)增產(chǎn)物的3` 端加上一個(gè)脫氧腺苷酸。
pGEM® -T 載體多克隆區(qū)T 突出端的兩側(cè)均有BstZI 酶切位點(diǎn)，使用BstZI 單酶消化即可釋放插入片段。也可選用適當(dāng)?shù)碾p酶消化釋放插入片段。pGEM® -T載體系統(tǒng)II 除了pGEM® -T 載體系統(tǒng)I 所有成分外，還包括JM109 感受態(tài)細(xì)胞。
特點(diǎn)
   . 快速連接：使用2X 快速連接緩沖液(2X Rapid Ligation Buffer)可以使連接反應(yīng)在室溫下1 小時(shí)內(nèi)完成。
. 藍(lán)/ 白篩選：pGEM® -T 載體包含有T7 和SP6 RNA 聚合酶啟動子，分別位于β - 半乳糖苷酶的α - 肽編碼區(qū)內(nèi)多克隆位點(diǎn)的兩側(cè)。α - 肽的插入失活允許在指示培養(yǎng)基上用顏色直接篩選重組克隆。
. f1 復(fù)制起始位點(diǎn)：：可用于制備單鏈DNA。
儲存條件   感受態(tài)細(xì)胞儲存于-70℃；其它組分儲存于-20℃。