說(shuō)明
   GeneClip™ U1 Hairpin Cloning Systems(GeneClip™ U1 發(fā)夾克隆系統(tǒng)) 由線性質(zhì)粒組成，這些質(zhì)粒是為了在人類(lèi)細(xì)胞中快速、簡(jiǎn)便地克隆人類(lèi)目的序列，來(lái)表達(dá)短發(fā)夾RNAs(shRNAs) 而設(shè)計(jì)的。轉(zhuǎn)染至人類(lèi)細(xì)胞中后，從包含U1 RNA 聚合酶啟動(dòng)子和siRNA 模板的DNA 質(zhì)�？捎行У剡M(jìn)行短干擾RNAs(siRNAs) 的體內(nèi)表達(dá)。U1啟動(dòng)子通常用于體外成功地產(chǎn)生發(fā)夾siRNAs。
為使發(fā)夾siRNA 插入pGeneClip™ 載體，將2 個(gè)短DNA 寡核苷酸退火，形成包含該發(fā)夾siRNA 的目的序列的DNA 插入物。退火后，寡核苷酸形成與pGeneClip™ Vector 末端匹配的突出末端，便于粘性末端連接。一經(jīng)轉(zhuǎn)染，RNA 聚合酶II 即在體內(nèi)轉(zhuǎn)錄發(fā)夾插入序列，生成發(fā)夾siRNAs。
特點(diǎn)   •  更多載體選擇：這些系統(tǒng)提供的載體含有各種用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞的抗生素抗性選擇標(biāo)記物，或用于確定轉(zhuǎn)染效率的hMGFP。
• 節(jié)省時(shí)間：載體以預(yù)消化的形式提供以減少載體制備的時(shí)間。
• 便利：每個(gè)系統(tǒng)都包含T4 DNA 連接酶, 2X 快速連接緩沖液, 寡核苷酸退火緩沖液和pGeneClip™ 載體。
• 輕松鑒定目的克�。菏褂肞stI 酶切快速鑒定陽(yáng)性重組體。