說明 由細菌抗藥基因編碼的氯霉素轉(zhuǎn)乙；(chloramphenicol acetyltransferase, CAT) 通過將氯霉素的一個或兩個羥基乙酰化而使其失活。在真核生物中沒有發(fā)現(xiàn)此基因，因而真核細胞沒有CAT 活性背景。Promega 的CAT Enzyme Assay System 可以用兩種方法監(jiān)控被轉(zhuǎn)染細胞中CAT 酶的活性：液閃記數(shù)法(LSC) 和薄層層析法(TLC)；可以對同一細胞提取物進行LSC 或TLC 檢測。TLC 檢測方法比LSC檢測方法靈敏度低且費時，但可直觀地對檢測結(jié)果進行確認。TLC 反應(yīng)產(chǎn)物需要通過放射自顯影或磷酸成像分析來檢測。 由細菌抗藥基因編碼的氯霉素轉(zhuǎn)乙；(chloramphenicol acetyltransferase，CAT)，催化乙酰輔酶A 上的乙酰基團轉(zhuǎn)移至氯霉素3` 位的羥基上。該酶可作為CAT 檢測中細胞粗提物的標準品，在37℃ 1 分鐘內(nèi)將1nmol 的丁酸或乙酸轉(zhuǎn)移至氯霉素上所需要的酶量稱為1 個單位。 丁酰輔酶A 也適用于氯霉素轉(zhuǎn)乙酰基酶的反應(yīng)。通過CAT 酶反應(yīng)可將丁；鶊F轉(zhuǎn)移至氯霉素上，并可通過液閃記數(shù)法或薄層層析法檢測酶的活性。 特點 . 快速：2-3 小時內(nèi)完成檢測。 • 線性：LSC 檢測酶活性線性范圍是3 個數(shù)量級。 • 靈敏：最低至3x10-4 單位(2pg) 的CAT 可被檢測。 • 耐用：報告基因裂解緩沖液允許對同一細胞提取物同時進行螢光素酶、CAT 和β- 半乳糖苷酶的檢測。