說明 Chroma-Glo™ Luciferase Assay System (Chroma-Glo™ 螢光素酶檢測系統(tǒng)) 和Chroma-Luc™ Vectors 能用于在樣品中加入單一試劑產(chǎn)生紅色和綠色(dual-color,雙色) 螢光。Chroma-Luc™ 載體由6 個質(zhì)粒構(gòu)成,含有一個合成的紅色叩頭蟲螢光素酶基因,或者兩個綠色叩頭蟲螢光素酶基因中的一個。CBRluc 含有發(fā)紅光的螢光素酶基因,而CBG68luc 和CBG99luc 含有發(fā)綠光的螢光素酶基因。Chroma-Luc™ 螢光素酶產(chǎn)生的雙色螢光用濾光法測量,既可對每個報告蛋白單獨測量,也可以幾乎同時測量。除了他們的螢光顏色不同之外,這三種Chroma-Luc™ 基因還有以下不同:CBG99luc 和CBRluc 具有99% 的DNA 和98% 的蛋白質(zhì)相似性,是用于瞬時表達檢測的理想選擇;CBG68luc 和CBRluc 具有68.9% 的DNA相似性,然而蛋白質(zhì)相似性確很高(>98%),它們用于穩(wěn)定表達檢測是最好的。這些基因中的每一個都具有基本載體構(gòu)造如多克隆位點(MCS),同時還有含SV40 啟動子和增強子的對照載體。Chroma-Glo™ 檢測系統(tǒng)是一種均質(zhì)檢測系統(tǒng),每一種Chroma-Luc™ 螢光素酶產(chǎn)生的螢光的半衰期>30 分鐘,因此無需樣品預(yù)處理就能對多個板進行操作。從同一孔中進行兩種報告基因檢測,是高效、可重復(fù)的高通量篩選方法。 特點 • 加入一種底物產(chǎn)生兩種報告基因信號:通過數(shù)據(jù)歸一化提高精確度和準確度,或使用兩個報告基因進行疊加實驗檢測。用濾光片在光譜上分開不同的螢光信號。 • 建立理想的對照或疊加系統(tǒng):使用高度同源的紅色和綠色螢光素酶來減少可能的RNA 和蛋白質(zhì)對報告基因表達的影響。 • 靈活:使用基本載體克隆目的調(diào)控元件,或者使用對照載體作為內(nèi)對照。 • 在最少的反常轉(zhuǎn)錄行為基礎(chǔ)上實現(xiàn)高表達:使用合成的基因設(shè)計以更容易可靠地獲得結(jié)果。