Component Listing for E1960 10 x 1 vial E151A Luciferase Assay Substrate 10 x 10ml E195A Luciferase Assay Buffer II 10 x 200μl E640A Stop & Glo® Substrate 10 x 10ml E641A Stop & Glo® Buffer 1 x 30ml E194A Passive Lysis Buffer, 5X Dual-Luciferase® Reporter (DLR™) Assay System (Dual-Luciferase® 雙螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)) 為雙報告基因檢測提供有效的手段。 在DLR™ 檢測中,螢火蟲(Photinus pyralis ) 螢光素酶和海腎(Renilla reniformis ) 螢光素酶的活性可在單個樣品中依次檢測。首先檢測螢火蟲螢光素酶,將螢光素酶檢測試劑II(Luciferase Assay Reagent II, LAR II)加入樣品中,產(chǎn)生的光信號至少持續(xù)1分鐘。定量螢火蟲螢光強(qiáng)度后,再在同一個樣品中加入Stop & Glo® 試劑,將上述反應(yīng)終止,同時啟動海腎螢光素酶反應(yīng)。使用帶有試劑自動注射器的發(fā)光檢測儀,可在4 秒內(nèi)完成兩個檢測。在DLR™ 檢測系統(tǒng)中,兩個報告基因產(chǎn)生的線性檢測的靈敏度均可達(dá)埃摩爾級(<10-18),在實(shí)驗宿主細(xì)胞內(nèi)均無內(nèi)源活性。而且,DLR™ 檢測的一體化模式既可快速定量檢測轉(zhuǎn)染細(xì)胞,也可用于快速定量檢測無細(xì)胞轉(zhuǎn)錄/ 翻譯反應(yīng)體系中的兩個報告基因。為了得到Dual-Luciferase® 試劑盒的最佳檢測結(jié)果,Promega推薦使用針對該檢測過程進(jìn)行過確證的發(fā)光檢測儀。這些發(fā)光檢測儀均帶有DLReady ™ 標(biāo)識。請參閱“通過DLReady ™ 確證的發(fā)光檢測儀”頁面,來了解相應(yīng)的儀器信息。pGL4 螢光素酶報告基因載體是針對DLR™ 檢測系統(tǒng)而設(shè)計。組成型表達(dá)的海腎螢光素酶載體可與任何實(shí)驗用螢火蟲螢光素酶載體聯(lián)合共轉(zhuǎn)染哺乳動物細(xì)胞。Cat.# E1960 和E1980 產(chǎn)品請注意:系統(tǒng)中已提供了足夠的Passive Lysis Buffer,能夠進(jìn)行96 孔板細(xì)胞的1,000 次檢測(一般每孔用20μl 1X PLB)。若需要更多的Passive Lysis Buffer( 如>100μl/ 孔),可單獨(dú)購買。 特點(diǎn) • 準(zhǔn)確性更高:使用海腎螢光素酶做內(nèi)對照可得到更精確的結(jié)果。• 方便:無需分開樣品,可節(jié)省平板和時間。• 靈敏:可用于研究弱啟動子,低水平表達(dá)/ 調(diào)控和轉(zhuǎn)染不佳的細(xì)胞的表達(dá)。• 線性范圍:線性范圍超過7 個數(shù)量級;活性很高的樣品一般無需稀釋。儲存條件 儲存于-20℃。