說明 無啟動子的螢火蟲螢光素酶載體主要是用來鑒定控制基因轉(zhuǎn)錄的重要區(qū)域中的可能的啟動子元件。我們提供含有三種經(jīng)過改造的不同螢火蟲螢光素酶基因(luc2, luc2P 或luc2CP) 的無啟動子載體。luc2 基因經(jīng)過改造,去除了大部分隱藏的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點,并通過編碼優(yōu)化提高了在哺乳動物細胞中的表達效率。luc2P、luc2CP 和RapidResponse™ 基因是在luc2 基因的基礎上增加了降解序列,從而可以調(diào)控luc2 基因在細胞中的半衰期。RapidResponse™ 基因?qū)Υ碳さ捻憫,但是以犧牲信號強度為代價。luc2P 基因( 半衰期為1 個小時) 反應比luc2 基因( 半衰期為3 個小時) 快,信號強度也適合,而luc2CP 基因( 半衰期為0.4 個小時) 反應更快但信號強度最弱。這些無啟動子載體含有不同選擇標簽(hygromycin( 潮霉素)、neomycin ( 新霉素) 或puromycin( 嘌呤霉素)) 和不含選擇標簽的可供訂購。 特點 • 基于以下原因擁有更好的靈敏度和生物相關性: • 報告基因表達更高:為了更適于哺乳動物細胞的表達,將合成的基因密碼子更加優(yōu)化。 • 降低了表達產(chǎn)物的背景和危險:去掉了隱藏的DNA 調(diào)控元件和轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點。 • 瞬時應答更快:Rapid Response™ 技術應用了去穩(wěn)定螢光素酶基因。其它的優(yōu)勢包括: • 更靈活的檢測選擇:可隨意選擇合成luc2 (Photinus pyralis ) 或hRluc (Renilla reniformis ) 報告基因。 • 可輕松地從瞬時轉(zhuǎn)換到穩(wěn)定細胞:有多種哺乳動物細胞選擇標記可供選擇。 • 可輕松在載體間轉(zhuǎn)移:具有常用的多克隆位點和獨特的SfiI 轉(zhuǎn)移設計。