說(shuō)明
    Non-Radioactive Phosphatase Assay Systems ( 非放射性磷酸酶檢測(cè)系統(tǒng)) 是測(cè)定蛋白磷酸酶活性的一個(gè)方便、靈活的方法。該系統(tǒng)確定的是游離磷酸的量，是通過(guò)反應(yīng)中形成的鉬酸鹽: 孔雀綠:磷酸復(fù)合物的吸光度值檢測(cè)出來(lái)的。該系統(tǒng)可與多種緩沖液組分和多種底物一起使用，包括天然的磷酸化蛋白和合成的磷酸肽。絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶分析試劑盒包含化學(xué)合成的磷酸肽RRA(pT)VA ，它是一種與多種絲氨酸/ 蘇氨酸磷酸酶( 包括蛋白磷酸酶2A、2B 和2C)適合的底物。然而提供的磷酸肽不是蛋白磷酸酶1 的最適底物，因?yàn)榈鞍琢姿崦? 對(duì)于底物的結(jié)構(gòu)要求十分嚴(yán)格。
    酪氨酸磷酸酶分析試劑盒包括兩種化學(xué)合成的磷酸肽, END (pY) INASL 和DADE(pY) LIPQQG，是大多數(shù)酪氨酸磷酸酶的底物。使用該系統(tǒng)檢測(cè)磷酸酶時(shí)，有效的磷酸鹽測(cè)定范圍是100-4,000pmol 。該磷酸酶檢測(cè)系統(tǒng)可以用于檢測(cè)以下樣品中的磷酸酶活性：細(xì)胞粗提物、組織提取物、部分純化的樣品、純化后的樣品。對(duì)于粗提物的應(yīng)用而言，高濃度的磷酸需要在檢測(cè)之前去除掉，使用提供的離心柱可以快速去除樣品中游離的磷酸鹽和其它的小分子量抑制劑。此外，獨(dú)特的鉬酸鹽染料添加劑與鉬酸鹽染料溶液結(jié)合使用，可幫助暴露在酸性的鉬酸鹽染料溶液的蛋白質(zhì)溶解，單獨(dú)使用鉬酸鹽染料溶液時(shí)，會(huì)引起蛋白沉淀。