LightShift (R) Chemiluminescent EMSA Kit/LightShift 化學(xué)發(fā)光EMSA試劑盒識別調(diào)控序列,確定蛋白-DNA結(jié)合區(qū)域及親和力。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
含有EBNA對照體系，可以幫助初次使用者進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并理解用于確定特異結(jié)合相互作用的方法。
極好地用于檢測核提取物中的低豐度蛋白。
靈敏度優(yōu)于放射性檢測和地高辛檢測方法。
與以往建立的通用的用于檢測DNA-蛋白相互作用的結(jié)合條件相互兼容。
Thermo Scientific Light-Shift化學(xué)發(fā)光EMSA試劑盒是一種非常強(qiáng)勁且靈敏的檢測系統(tǒng)，通過進(jìn)行電泳遷移率實(shí)驗(yàn)(EMSA)鑒定蛋白質(zhì)-DNA結(jié)合相互作用。這個(gè)試劑盒包括用于建立和定制蛋白-DNA結(jié)合反應(yīng)的試劑，用于檢測試劑盒體系的一組對照DNA提取物和蛋白提取物，作為探針去識別生物素標(biāo)記靶DNA的穩(wěn)定辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈親和素，以及非常靈敏的用于檢測的化學(xué)發(fā)光底物。
 整個(gè)實(shí)驗(yàn)中要求實(shí)驗(yàn)者準(zhǔn)備的是已純化的末端生物素標(biāo)記的靶DNA，需要檢測的蛋白提取物，尼龍膜和基本的電泳設(shè)備。靶DNA可以通過直接合成產(chǎn)生帶有生物素標(biāo)記的5’或3’末端，或者可以在合成之后使用Thermo Scientific 生物素DNA3´末端標(biāo)記試劑盒（見下頁產(chǎn)品目錄號89818）標(biāo)記上生物素。可通過不同方法獲得核、胞質(zhì)或全細(xì)胞蛋白提取物，包括Thermo Scientific NE-PER 核蛋白和胞質(zhì)蛋白提取試劑盒(產(chǎn)品目錄號78833)
LightShift* EMSA檢測的原理與Western blot類似。生物素末端標(biāo)記的雙鏈DNA與核提取物或者純化的因子共同孵育，之后進(jìn)行非變性膠電泳。然后將DNA快速（30分鐘）轉(zhuǎn)到正極（帶正電）的尼龍膜上，紫外交聯(lián)，使用HRP標(biāo)記的鏈親和素進(jìn)行孵育，再與底物孵育。從標(biāo)記到獲得結(jié)果的整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程可以在一天內(nèi)完成

貨號	產(chǎn)品介紹	包裝
20148	LightShift 化學(xué)發(fā)光EMSA試劑盒 足夠用于100個(gè)結(jié)合反應(yīng)和檢測800cm2膜的試劑 包括：10×結(jié)合緩沖液 生物素-EBNA對照DNA 未標(biāo)記的ENBA DNA ENBA提取物 Poly（dI•dC） 50%甘油 1%NP-40 1M 氯化鉀 100mM氯化鎂 200mM EDTA，pH8.0 5×上樣緩沖液 穩(wěn)定的辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈親和素 魯米諾/增強(qiáng)溶液 穩(wěn)定的過氧化物溶液 封閉緩沖液 4×洗滌緩沖液 底物平衡緩沖液	試劑盒   1ml 50μl 50μl 125μl 125μl 500μl 500μl 1ml 500μl 500μl 1ml 1.5ml 80ml 80ml 500ml 500ml 500ml