SILAC蛋白定量試劑盒及試劑 對(duì)于差異蛋白表達(dá)進(jìn)行定量分析產(chǎn)品特點(diǎn):標(biāo)記物能夠100%的整合到活細(xì)胞的蛋白中。可重復(fù) – 降低由于樣品制備不同而造成的實(shí)驗(yàn)內(nèi)差異。靈活 – 培養(yǎng)基中缺乏L-賴(lài)氨酸和L-精氨酸兩種氨基酸,因此可以通過(guò)兩種氨基酸的同位素標(biāo)記更加完全的覆蓋整個(gè)蛋白質(zhì)組。通用 – 可以對(duì)多種在DMEM或RPMI 1640培養(yǎng)基中能夠培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的蛋白進(jìn)行標(biāo)記,這些細(xì)胞包括HeLa,293T,COS7,U2OS,A549,A431,HepG2,NIH 3T3,Jurkat及其它。兼容– 可以通過(guò)分化培養(yǎng)基測(cè)定人間質(zhì)干細(xì)胞或小鼠胚胎干細(xì)胞中調(diào)節(jié)發(fā)育的重要蛋白。在細(xì)胞培養(yǎng)中使用氨基酸進(jìn)行穩(wěn)定的同位素標(biāo)記(SILAC)是鑒定和定量復(fù)雜蛋白樣品中相關(guān)差異的變化的一種有效的方法。SILAC方法通過(guò)體內(nèi)代謝將“重的”13C-或15N標(biāo)記的氨基酸整合到蛋白中然后進(jìn)行質(zhì)譜(MS)分析以便加快對(duì)蛋白的測(cè)定、鑒定、定量和理解。應(yīng)用:可以使用專(zhuān)門(mén)針對(duì)干細(xì)胞的試劑盒對(duì)干細(xì)胞分化中的蛋白進(jìn)行鑒定。可以對(duì)不同細(xì)胞處理后的蛋白豐度的相關(guān)變化進(jìn)行定量的分析。可以對(duì)沒(méi)有抗體的蛋白進(jìn)行定量分析。正常細(xì)胞vs.疾病細(xì)胞的蛋白表達(dá)譜的繪制。可以在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中對(duì)成千上萬(wàn)的蛋白進(jìn)行鑒定和定量。SILAC需要在含有輕或重的必需氨基酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞;例如,分別含有12C6及13C6 L-賴(lài)氨酸。常規(guī)的實(shí)驗(yàn)包括在含有輕氨基酸(對(duì)照)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一批細(xì)胞,同時(shí)在含有重氨基酸(實(shí)驗(yàn)組)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)相同的另一批細(xì)胞。輕、重氨基酸通過(guò)自然的細(xì)胞內(nèi)蛋白合成的過(guò)程整合到蛋白中。在對(duì)一個(gè)樣品進(jìn)行化學(xué)處理或者遺傳操作使其蛋白質(zhì)組發(fā)生變化之后,將從兩種細(xì)胞中得到的蛋白等量的混合在一起,然后利用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行分離并利用胰酶進(jìn)行消化然后進(jìn)行MS分析。由于標(biāo)記有重和輕氨基酸的多肽在化學(xué)性質(zhì)上是完全相同的,因此這兩種多肽在反相柱洗脫時(shí)是同時(shí)洗脫的,因此能夠在MS分析中同時(shí)檢測(cè)到兩種多肽。然后就可以利用來(lái)自于每種蛋白的同位素標(biāo)記的多肽的相 貨號(hào) 產(chǎn)品介紹 包裝 價(jià)格 89982 SILAC蛋白定量試劑盒– RPMI 1640 試劑盒包括:SILAC†RPMI培養(yǎng)基 透析過(guò)的FBS 13C6 L賴(lài)氨酸•2HCl L賴(lài)氨酸•2HCl L精氨酸•HCl 試劑盒 2 x 500ml 2 x 50ml 50mg 50mg 2 x 50mg 6093