Bac-to-Bac® Baculovirus Expression System
Bac-to-Bac® 桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng) (Bac-to-Bac® Baculovirus Expression System) 能高效生成重組桿狀病毒,用于在昆蟲細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)測(cè)試。 Bac-to-Bac® 系統(tǒng)依賴于通過(guò) E. coli 中的位點(diǎn)特異性轉(zhuǎn)座生成重組桿狀病毒,而不是通過(guò)昆蟲細(xì)胞內(nèi)的同源重組(圖 1)。 該系統(tǒng)的特點(diǎn)為:
■節(jié)約時(shí)間的表達(dá)桿狀病毒質(zhì)粒。 使用 Bac-to-Bac®,pFastBac™ 載體的表達(dá)盒在 DH10Bac™ E. coli 感受態(tài)細(xì)胞中與親代桿狀病毒質(zhì)粒重組形成桿狀病毒表達(dá)質(zhì)粒。 然后,將該桿狀病毒質(zhì)粒轉(zhuǎn)染進(jìn)昆蟲細(xì)胞,產(chǎn)生重組桿狀病毒顆粒。
■簡(jiǎn)單的菌落篩選。 DH10Bac™ E. coli 中的親代桿狀病毒質(zhì)粒含有 lacZα 基因的片段。 表達(dá)盒轉(zhuǎn)座進(jìn)桿狀病毒質(zhì)粒后,lacZα 基因被破壞,因此可以進(jìn)行重組體藍(lán)/白篩選。 因此,重組菌落的鑒別非常簡(jiǎn)單。
■重組蛋白的快速純化。 pFastBac™ HT 載體生成帶組氨酸標(biāo)簽的重組蛋白。 因此可以使用鎳螯合樹脂快速純化蛋白質(zhì)。
Bac-to-Bac® 桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)設(shè)計(jì)用于重組桿狀病毒的快速小規(guī)模生產(chǎn)。 pFastBac™ 1 載體提供用于蛋白質(zhì)表達(dá)的多角體蛋白強(qiáng)啟動(dòng)子和用于簡(jiǎn)化克隆的大型多克隆位點(diǎn)。
Promoter: Polyhedrin
Vector Type: pFastBac
Product Size: 1 kit
Cloning Method: Restriction Enzyme ⁄ MCS
Protein Tag or Fusion: Untagged
Regulatory Statement: For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Each Bac-to-Bac® Baculovirus Expression System includes 10 µg of pFastBac™1 vector, 0.5 ml MAX Efficiency® DH10Bac™ Chemically Competent Cells, pFastBac™ 1-Gus control vector, and 1 ml of Cellfectin® Reagent.
Store MAX Efficiency® DH10Bac™ Competent Cells at -80°C. Store Cellfectin® Reagent and vectors at +4°C. All components are guaranteed stable for 6 months when properly stored. |