B-PER (R) Reagent(B-PER細(xì)菌總蛋白抽提試劑) Thermo Scientific B-PER細(xì)菌蛋白抽提試劑主要用于從革蘭氏陰性細(xì)菌,金黃色葡萄球菌,幽門(mén)螺旋桿菌,大腸桿菌菌株提可溶性蛋白。使用這種基于試劑的裂解方法則無(wú)需使用超聲破碎等刺耳的機(jī)械方法。這些簡(jiǎn)單易用的細(xì)胞裂解溶液采用溫和的非離子型去垢劑來(lái)裂解細(xì)胞和溶解蛋白,不會(huì)引起蛋白變性。加入DNaseI和溶菌酶等酶可以提高難以純化的大分子量蛋白的得率。B-PER*試劑與GST純化和固定化的組氨酸標(biāo)簽金屬親和色譜(IMAC)等下游蛋白純化方法也是相容的。純化或者鑒定重組蛋白的第一步就是裂解細(xì)胞和釋放蛋白。超聲和其他細(xì)胞裂解方法的效率不如B-PER溶液,而自制裂解的溶液含有干擾下游應(yīng)用的去垢劑和成分。B-PER裂解試劑有兩種緩沖體系,分別是20 mM Tris緩沖液(pH 7.5)和磷酸鹽緩沖液(產(chǎn)品貨號(hào) 78266), 所得到的裂解物與電泳、親和純化、免疫沉淀、蛋白相互作用分析、交聯(lián)和蛋白標(biāo)記等經(jīng)典的下游實(shí)驗(yàn)完全兼容。如果需要,也可以通過(guò)透析或者凝膠過(guò)濾(脫鹽柱)去除溫和的去垢劑成分。產(chǎn)品特點(diǎn):即時(shí)可用 – B-PER裂解試劑提供了使用溫和的非離子型去垢劑(專(zhuān)利)一步裂解大腸桿菌的方法,并且有Tris或者磷酸緩沖鹽液配方可供選擇。 簡(jiǎn)單、快速 – 僅需向細(xì)菌沉淀中加入B-PER裂解試劑并搖動(dòng)10分鐘。沉淀細(xì)胞碎片即可回收可溶性蛋白。 得率極高 – 可以從細(xì)菌裂解物中回收可溶和不可溶的重組蛋白和純化包涵體到接近均一水平靈活 – B-PER裂解試劑適用于任何規(guī)模的蛋白抽提。有含酶或不含酶的磷酸鹽緩沖液、1X 和2X Tris緩沖液體系。 相容性強(qiáng) – 與蛋白酶抑制劑混合物完全兼容,所得的蛋白抽提物可用于蛋白質(zhì)分析、親和純化 (例如,GST, 6xHis)和其他應(yīng)用。 方便即用的形式: – B-PER和B-PER II (2X)試劑不含– B-PER (磷酸鹽緩沖液)試劑不含氨基,可以直接用于蛋白標(biāo)記和交聯(lián)。– 含酶的B-PER和B-PER Direct裂解試劑- -含有提高裂解和回收效率的溶菌酶和DNA酶