X-α-Gal是一種酵母半乳糖苷酶 (MEL1) 的顯色底物，用于在培養(yǎng)基上直接檢測GAL4系統(tǒng)的酵母雙雜交作用。通過藍(lán)白顏色篩選，快速和簡便地識別陽性的藍(lán)色克隆，無需費(fèi)時的β-半乳糖苷酶報告基因檢測。 X-α-Gal檢測酵母MEL1基因的激活，MEL1是GAL4酵母雙雜交系統(tǒng)的一個報告基因，編碼分泌型的α-半乳糖苷酶。該酶可水解無色的X-α-Gal底物并最終產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物。表達(dá)α-半乳糖苷酶的酵母菌落在含有X-α-Gal的培養(yǎng)基上顯藍(lán)色，即陽性的雙雜交作用。用 途：（1）α-半乳糖苷酶的顯色底物，形成藍(lán)色沉淀。在培養(yǎng)基上直接檢測酵母雙雜交相互作用，利用此底物可以省去雙雜交體系中的β-半乳糖苷酶溶液和filter-lift assays；（2）用于區(qū)分腸桿菌科內(nèi)的不同菌種以及區(qū)分雙歧桿菌和乳酸菌；（3）在組織化學(xué)中用于酶活性的檢測；儲存液的配制及使用步驟：A）涂布于預(yù)制平板：溶解24mg X-α-gal于6 mL DMF，終濃度為4mg/ mL的溶液。①涂布200ul(15cm) 或者100ul（10cm）X-α-gal 儲存液于預(yù)制平板上；②放于37℃培養(yǎng)箱至液體被吸收（由于DMF揮發(fā)性低，最長可放4小時）；③將轉(zhuǎn)化細(xì)菌或酵母涂于平板上，于37℃或30℃培養(yǎng)直至藍(lán)色菌落出現(xiàn)。B）直接加入瓊脂中：溶解60mg X-α-gal于3 mL DMF，終濃度為20mg/ mL的溶液。①將已滅菌瓊脂培養(yǎng)基冷卻至50-55 ℃；②往已冷卻的培養(yǎng)基中直接加入2 ml -10 ml 20 mg/ ml X-α-Gal儲存液，混勻，快速倒平板。外 觀：白色或灰白色結(jié)晶粉末，或者無色結(jié)晶；溶 解 度（1%甲醇溶液）：無色，清澈；儲 存： -15°C避光避潮保存；