關(guān)于非放射性標(biāo)記技術(shù)
羅氏應(yīng)用科學(xué)部是最早致力于向用戶提供非放射標(biāo)記技術(shù)的公司之一,讓更多的科研工作者們可以避免使用危險的放射性同位素。羅氏專利的地高辛產(chǎn)品上市近二十年,盡管有許多出色的競爭者涉足這一領(lǐng)域,盡管有定量PCR技術(shù)的應(yīng)用,DIG系統(tǒng)仍然是非放射性高效標(biāo)記&檢測技術(shù)的首選。
地高辛技術(shù)優(yōu)勢
地高辛標(biāo)記技術(shù)源于一種從洋地黃類植物(毛地黃和毛花毛地黃)中提取的類固醇物質(zhì)—— Digoxigenin (DIG)。由于洋地黃植物的花和葉片Digoxigenin在自然界中的唯一來源,因此抗DIG的抗體不會與其他的生物物質(zhì)結(jié)合,從而可以滿足特異性標(biāo)記的需要。這一點(diǎn),正是DIG勝于生物素(Biotin)的地方——同樣是小分子標(biāo)記物,生物素廣泛存在于各種組織中,對于靈敏度很高的標(biāo)記檢測實(shí)驗(yàn)來說,樣品自身含有的內(nèi)源生物素,就會對結(jié)果產(chǎn)生干擾。地高辛就能夠很好地避免這個問題。
地高辛技術(shù)特點(diǎn)
1.可用于標(biāo)記核苷酸或蛋白質(zhì)
2.檢測方法:顯色法、熒光或化學(xué)發(fā)光法
3.安全環(huán)保,不接觸放射性物質(zhì),不會對環(huán)境造成污染
4.曝光時間短,結(jié)果顯示時間以分鐘計算,無需幾小時甚至幾天的自顯影過程
5.地高辛標(biāo)記的探針至少可貯存一年以上,可一次大量制備
6.可輕松進(jìn)行探針剝離和重探
應(yīng)用領(lǐng)域
地高辛系統(tǒng)能夠安全高效地標(biāo)記DNA、RNA或是寡聚核苷酸探針,這些探針可以被廣泛應(yīng)用在:
1.Southern blot, Northern blot, dot blot
2.菌斑雜交
3.Microarray
4.ELISA
5.原位雜交
標(biāo)記DNA探針 標(biāo)記RNA探針 標(biāo)記寡核苷酸探針 Southern blotting Northern blotting Colony and plaque hybridization In situ hybridization ELISA 化學(xué)發(fā)光法 直觀的顯色法