中國科技大學(xué)的劉熙秋教我們?nèi)绾螒?yīng)對Matrigel鋪板過程中厚度不均一，產(chǎn)生氣泡的情況。
背景：Matrigel是一種可溶性的基底膜基質(zhì)，可以有效幫助上皮細(xì)胞等各類細(xì)胞的附著和分化。在進(jìn)行血管增生的研究中，經(jīng)常需要將血管內(nèi)皮細(xì)胞種在鋪有Matrigel的細(xì)胞板上，觀察經(jīng)過不同的藥物處理后，內(nèi)皮細(xì)胞分化形成管狀結(jié)構(gòu)能力的變化。如果Matrigel包被的不好，出現(xiàn)厚度不均，有氣泡產(chǎn)生的情況，則會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成嚴(yán)重的干擾。
方法改進(jìn)：
1、Matrigel從-80度保存狀態(tài)解凍時(shí)一定要置于冰盒中，并將冰盒在4度冰箱放置過夜，這樣可以使Matrigel解凍得更溫和，膠質(zhì)更均一。
2、在鋪板過程中使用的細(xì)胞板、無菌槍頭等最好也置于4度冰箱中過夜冷卻充分，這樣在操作過程中可以減緩Matrigel固化的時(shí)間，有利于均勻鋪板。
3、在鋪板過程中吸取Matrigel的量比預(yù)期的稍微多一點(diǎn)（比如24孔板里加入300μL Matrigel即可實(shí)現(xiàn)很好的鋪板，吸取Matrigel的體積可以定在320μL左右），不要直接將Matrigel滴加到孔中央，而是順時(shí)針方向沿著孔的周圍轉(zhuǎn)一圈滴加，注意不要將Matrigel完全從槍頭中打出（這樣就非常容易產(chǎn)生氣泡而且氣泡不易除去）而是留一些殘留。滴加完畢后將細(xì)胞板先順時(shí)針傾斜（左-上-右-下），然后按照十字形方向（左-右-上-下）傾斜，最后在室溫條件下穩(wěn)定15分鐘。
結(jié)果：經(jīng)過多次實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，Matrigel的鋪板效果非常好，有效減少了對于后期實(shí)驗(yàn)的干擾。

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