英文名:5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside或5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside,
中文名:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷。
CAS :240-90-6。
X–Gal是β–半乳糖苷酶(β–galactosidase)的底物,水解后呈藍(lán)色;谶@個(gè)特點(diǎn),pUC系列載體DNA(或其他帶有l(wèi)acZ 基因載體DNA)以lacZ 缺失細(xì)胞為宿主進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)、或用M13噬菌體載體DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí),如果在平板培養(yǎng)基中加入X–Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互補(bǔ)性,可以根據(jù)是否呈現(xiàn)白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑選出基因重組體。
使用方法 :首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液(-20℃避光保存),然后在100 ml的瓊脂培養(yǎng)基中,加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG(24 mg/ml)和100 μl的Amp(100 mg/ml),制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培養(yǎng)基。當(dāng)DNA片段插入至pUC系列載體(或其他帶有l(wèi)acZ、Amp基因載體),然后轉(zhuǎn)化至lacZ缺失細(xì)胞中后,涂布上述的X–Gal、IPTG、Amp平板培養(yǎng)基,可根據(jù)長(zhǎng)出菌體的藍(lán)白色,而方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。
注意事項(xiàng) :
◆ 培養(yǎng)噬菌體時(shí),Top agar中的添加量為:50 μl/3 ml(20mg/ml)。
◆ 含有X-Gal的培養(yǎng)基4℃避光保存,須在1~2周內(nèi)使用。
Amresco相關(guān)產(chǎn)品資料:
Product: X-GAL
Grade: ULTRA PURE GRADE
Appearance: White powder
Mol. Formula: C14H15BrClNO6
Mol. Weight: 408.64
Description: 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-beta-D-Galactopyranoside
Code: 0428