應(yīng)用程序
細(xì)胞凋亡檢測光度酶免疫法用于定量測定體外細(xì)胞質(zhì)histone-associated片段(單和oligonucleosomes)后誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡。
該套件包含一個解決方案,允許用戶終止反應(yīng)的底物和運行試驗條件下的定義,使之適用于高吞吐量的應(yīng)用。
效益
•一步酶聯(lián)免疫吸附試驗
•高靈敏度:(5×102細(xì)胞/毫升)
•快速性能:(3-4小時)
•積極控制包括
•prelabeling細(xì)胞沒有必要
•非放射性檢測系統(tǒng)
•沒有限制
•容易處理
•低背景
•抑制人體抗因子
•功能測試
產(chǎn)品說明
檢測時間:
3 -4小時
負(fù)控制:
取決于細(xì)胞培養(yǎng)條件下,每個成倍增長的永久性細(xì)胞培養(yǎng)中含有一定量的死細(xì)胞(通常約3- 8%)。在免疫,這些固有的死細(xì)胞在未經(jīng)處理的樣品(無cell-death-inducing劑)將造成一定的吸光度值(陰性對照)。
積極控制:
一個復(fù)雜的DNA -組蛋白作為一個積極的控制。
材料樣品:
細(xì)胞質(zhì)組分(裂解)的細(xì)胞系,細(xì)胞體外,細(xì)胞培養(yǎng)上清,和血清或血漿
靈敏度:
精確的檢測限死亡/死細(xì)胞在特定的樣本強烈依賴于動力學(xué)的細(xì)胞死亡,細(xì)胞毒性劑使用,和數(shù)額的影響細(xì)胞的細(xì)胞的總?cè)丝凇J褂脝?喜樹堿(凸輪)作為細(xì)胞模型系統(tǒng)的細(xì)胞死亡,免疫允許特定的檢測單和oligonucleosomes在細(xì)胞質(zhì)部分125個細(xì)胞當(dāng)量/好。
特異性:
抗組蛋白與蛋白之間,h2a,重組,h,各組不同物種(例如,人類,小鼠,大鼠,倉鼠,奶牛,負(fù)鼠,爪)。D NA結(jié)合單和雙鏈脫氧核糖核酸。因此,該法可以檢測單和oligonucleosomes從不同的物種,可用于測量細(xì)胞凋亡在許多不同的細(xì)胞系統(tǒng)。
背景信息
不同類型的真核細(xì)胞死亡可分的形態(tài)和生化標(biāo)準(zhǔn):壞死和凋亡。壞死的同時,增加離子通透性的質(zhì)膜;細(xì)胞膨脹和質(zhì)膜破裂,幾分鐘內(nèi)(滲透溶解)。細(xì)胞凋亡的特點是細(xì)胞膜起泡(zeiosis),細(xì)胞質(zhì)凝聚,并激活一個內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶。這鈣離子和鎂離子依賴性核酸切割雙鏈脫氧核糖核酸在最方便的internucleosomal連接區(qū)域,生成單和oligonucleosomes。與此相反,脫氧核糖核酸核小體核心組蛋白緊密結(jié)合h2a,重組,h,各組,并從而防止切割的內(nèi)切酶。脫氧核糖核酸片段的產(chǎn)生是一個離散的倍數(shù)180-bp亞基,檢測作為一個“階梯”瓊脂糖凝膠提取和分離的支離破碎。豐富的單和oligonucleosomes在細(xì)胞質(zhì)中的細(xì)胞凋亡是由于這一事實,降解發(fā)生前的幾小時的血漿膜破裂。
內(nèi)容
1.anti-histone-biotin(克隆h11-4)
2.anti-dna-pod(克隆mca-33)
3積極控制。
4孵化緩沖區(qū)。
5。裂解緩沖液
6基板緩沖區(qū)。
7.abts片
8.abts別解
9微孔板(鏈霉親和)。
10膠蓋箔。