英文名: DNase I，Deoxyribonuclease I
中文名稱: 脫氧核糖核酸酶I
說明: 脫氧核糖核酸酶I是一種可以消化單鏈或雙鏈DNA產(chǎn)生單脫氧核苷酸或單鏈或雙鏈的寡脫氧核苷酸的核酸內(nèi)切酶。DNase I水解單鏈或雙鏈DNA后的產(chǎn)物，5'端為磷酸基團，3'端為羥基。
DNase I活性依賴于鈣離子，并能被鎂離子或二價錳離子激活。鎂離子存在條件下，DNase I可隨機剪切雙鏈DNA的任意位點；二價錳離子存在條件下，DNase I可在同一位點剪切DNA雙鏈，形成平末端，或1-2個核苷酸突出的粘末端。
特點：不含RNase(RNase free)，可以用于各種RNA樣品的處理。提供了用于DNase I失活所需的EDTA。
用途：制備不含DNA的RNA樣品；RT-PCR反應(yīng)前RNA樣品中去除基因組DNA等可能的DNA污染；體外T7, T3, SP6等RNA Polymerases催化的RNA轉(zhuǎn)錄后去除DNA模板； DNase I footprinting研究DNA-蛋白質(zhì)相互作用；缺口平移(nick translatioin)；產(chǎn)生DNA隨機片斷文庫；細胞凋亡TUNEL檢測中部分剪切基因組DNA作為陽性對照。
來源：從牛胰腺純化得到。
分子量：約32kDa(單體)。
活性定義：37℃10分鐘內(nèi)，將能夠完全降解1μg pBR322質(zhì)粒DNA所需的酶量定義為1個活性單位。
活性檢測條件：40mM Tris-HCl(pH8.0)，10mM MgSO4，1mM CaCl2，1μg of pBR322 DNA。
純度：不含其它DNA內(nèi)切酶和外切酶，不含RNA酶。
酶儲存溶液：50mM Tris-acetate(pH7.5)，10mM CaCl2，50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X)：100mM Tris-HCl(pH7.5 at 25℃)，25mM MgCl2，1mM CaCl2。
失活或抑制：加入EDTA至終濃度為2.5mM后，65℃加熱10分鐘可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金屬離子螯合劑，達到毫摩爾/升濃度的鋅離子，0.1%的SDS，DTT、巰基乙醇等還原劑，50-100mM以上鹽濃度均對DNase I有顯著抑制作用。
保存條件：-20℃保存。
注意事項： 如需對酶進行稀釋，可以用酶儲存液(50mM Tris-acetate(pH 7.5)，10mM CaCl2，50%(v/v)glycerol)進行稀釋。
Simga相關(guān)產(chǎn)品資料
Sigma D5025 Deoxyribonuclease I from bovine pancreas
Type IV, lyophilized powder, Protein ≥80 %, ≥2,000 Kunitz units/mg protein
Synonym: Deoxyribonucleate 5′-oligonucleotido-hydrolase, DNase I
CAS Number: 9003-98-9
Description
Frequently Asked Questions Live Chat and Frequently Asked Questions are available for this Product.
Analysis Note Protein determined by biuret.
Application Used for the removal of DNA from protein samples.
Preparation N