膠原酶(collagenase)是從溶組織梭狀細(xì)胞芽孢桿菌提取制備的,主要水解結(jié)締組織中膠原蛋白成分。當(dāng)擬消化的組織較硬,內(nèi)含較多結(jié)締組織或膠原成分時(shí),用胰蛋白酶解離細(xì)胞的效果較差,這時(shí)可采用膠原酶解離細(xì)胞法。 膠原酶僅對(duì)細(xì)胞間質(zhì)有消化作用而對(duì)上皮細(xì)胞影響不大。因此適于消化分離纖維性組織、上皮及癌組織,可使上皮細(xì)胞與膠原成分分離而不受損害。常用劑量為最終濃度200U/ml(約為1mg/mL)或0.03%~0.3%。膠原酶分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝細(xì)胞專用膠原酶,要根據(jù)所要分離消化的組織類型選擇膠原酶類型。
1、膠原酶Ⅰ用于上皮、肺,脂肪和腎上腺組織細(xì)胞的分離。用于消化組織中連接部分使其成為單個(gè)細(xì) 胞,用于哺乳動(dòng)細(xì)胞的分離。
2、膠原酶Ⅳ包含至少7種蛋白酶成分,分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織。
3、膠原酶Ⅴ包含至少7種蛋白酶成分,分子量從68-130KD不等。它可用于胰腺小島組織的分離,將結(jié)締組織分離成單個(gè)細(xì)胞。
4、膠原酶Ⅱ適用于肝臟,骨,甲狀腺,心臟和唾液腺組織。
簡(jiǎn)介
膠原酶的配置
膠原酶的使用