QIAGEN OneStep RT-PCR Kit 快速成功的一步式RT-PCR快速方便的單管反應適合各種RNA模板,無需優(yōu)化反應條件獨特的酶組合,確保反應的高特異性和高靈敏度經(jīng)優(yōu)化的緩沖體系確保了高效的逆轉錄和擴增過程QIAGEN OneStep RT-PCR Kit專為進行便利、高靈敏度的一步式RT-PCR設計。其獨特的酶和特別設計的緩沖液確保了逆轉錄和PCR反應高效、準確的進行,無需進行優(yōu)化。 QIAGEN OneStep RT-PCR Enzyme Mix含有為逆轉錄和PCR反應特別設計的酶。Omniscript和Sensiscrip逆轉錄酶對RNA模板有高度親和性,確保了RNA逆轉錄的靈敏度達到1 pg到2 µg。逆轉錄完成后,升溫至95°C,保持15分鐘,活化HotStarTaq DNA Polymerase,同時使逆轉錄酶失活。這種方法可減少引物二聚體等非特異性擴增產(chǎn)物的生成,并減小背景影響,確保RT-PCR的高度靈敏性和可重復性(參見"使用少量模板進行高特異性RT-PCR"和"高效檢測病毒RNA")。 退火溫度范圍大引物的最佳退火溫度取決于堿基對的組成(如:A、T、G、C核苷酸的比例)、引物的濃度和反應的離子環(huán)境。QIAGEN PCR Buffers含有K+和NH4+。使用該緩沖液可在很大的溫度范圍內增加特異性PCR產(chǎn)物的產(chǎn)量(參見"QIAGEN PCR Buffers中的鉀離子和銨離子促進特異性產(chǎn)物的生成")。其原理是破壞非特異性結合的引物對,使反應更加活躍,減少繁瑣的溫度優(yōu)化過程。相反,如使用僅含 K+的PCR或一步式RT-PCR緩沖液,PCR最佳退火溫度的范圍較小,可靠性較差;參見"一步式RT-PCR退火溫度的影響"。 QIAGEN OneStep RT-PCR Buffer專為提高逆轉錄和PCR擴增的效率而設計。該緩沖液含有新型添加物,可防止逆轉錄酶對PCR擴增的抑制(這是一步式RT-PCR的常見問題)。該緩沖液確保了在較大溫度范圍和Mg2+濃度范圍內,引物與模板特異性結合,可對所有RNA模板進行高效的 RT-PCR擴增。QIAGEN OneStep RT-PCR Kit含有Q-Solution,這是可修飾核酸的解鏈行為的新型添加物。Q-Solution可促進高GC含量或含較多二級結構的模板的逆轉錄和擴增(參見"使用Q-Solution對高GC含量的模板進行RT-PCR")。使用Q-Solution可簡化復雜模板RT-PCR的優(yōu)化過程。QIAGEN OneStep RT-PCR Kit含有您所需的所有試劑,可進行快速、簡便的高靈敏度RT-PCR(參見"獲得可靠的一步式RT-PCR結果")。