Pronase E 鏈霉蛋白酶E
Protease from Streptomyces griseus
(鏈霉蛋白酶是從鏈球菌中分離獲得的一種絲氨酸蛋白酶和酸性蛋白酶的混合物)
英文名稱: Pronase E；Actinase E；Proteinase, streptomyces griseus；Pronase；Proteline；s. Griseus protease；s. Griseus proteinase；Streptomyces griseus protease；Streptomyces griseus proteinase；pronase f. streptomyces griseus
中文名稱：鏈絲菌蛋白酶；鏈霉菌蛋白酶
CAS號：9036-06-0
來源：From streptomyces griseus
活力(Casein;pH7.4;40℃)：≥4000U/g
pH范圍：5.0～9.0
分子量：15000-27000
性狀：白色或微褐色粉末。為從灰色鏈霉菌(Streptomyces griseus)中分離出的一種非特異蛋白水解酶(Protease)的專有名稱。分子量20000。易溶于鹽水和稀鹽溶液，最適pH值7.8～8.0
用途：生化研究，裂開蛋白質(zhì)的肽鍵，有極強的蛋白水解作用，能水解纖維蛋白、黏蛋白。本品僅供科研使用,用于提取DNA和RAN時蛋白消化；研究蛋白結(jié)構(gòu)；從純化的糖蛋白中獲得糖肽等。
外觀：淺棕色凍干粉
儲存條件：4℃
長期保存：-20℃
鏈霉蛋白酶消化酶的配制
貯存液濃度20mg／m1，-20℃保存。最佳反應緩沖液為0．01mol／LTris—HCl(pH7．8)，0.01mol／LEDTA和0．5％SDS。常用工作濃度lmg／m1，工作溫度37℃。
消化酶的選擇
在選擇用何種酶消化時，應針對要顯示的抗原成分不同而選用不同的酶。一般胃蛋白酶和菠蘿蛋白酶消化主要用于細胞間質(zhì)抗原的檢測，例如纖連蛋白(fibronectin)、層黏連蛋白(1aminin，LN)和各型膠原的顯示；其余酶消化均可用于細胞內(nèi)抗原的檢測。在配制蛋白酶時，應考慮到酶的最佳pH。例如胰蛋白酶的最佳pH為7．6，要在鈣離子的激活下于37℃才能達到最佳效率；而胃蛋白酶則在酸性pH值下才能達到最佳效率。另外，經(jīng)酶消化后的切片應充分洗滌，以去除殘留的消化酶，否則會對抗體或組織進行緩慢消化，影響抗原抗體的結(jié)合，破壞組織結(jié)構(gòu)。陽性和陰性對照片應同時消化，避免人為差異。
ROCHE相關(guān)產(chǎn)品資料：
Application ： Total degradation of proteins during the isolation of DNA and RNA; (it is not necessary to let pronase self-digest prior to use). Total hydrolysis of proteins in research and for technical purposes. Tissue dissociation in conjunction with collagenase and trypsin. Production of glycopeptides from purified glycoproteins.
Product Description ： Inhibitors: Complete Protease Inhibitor Cocktail Tablets
Optimum pH: 6.0 - 7.5, depending on type of protease activity
Specific activity: approx. 7,000 U/g lyophilizate at 40°C with casein as the substrate, pH 7.5. One unit is the enzyme activity that liberates folin-positive amino acids and peptides, corresponding to 1 µmol Tyr in 1 min under assay conditions.
Specificity: Mixture of several nonspecific endo- and exoproteases that generally digest proteins down to single amino acids. Resolves carboxylic acids and alcohols.
Working concentration: 0.5