用層析法，電泳法，免疫化學(xué)的方法對(duì)蛋白樣本進(jìn)行分離或分析前通常需要先進(jìn)行蛋白定量。用比色法進(jìn)行蛋白定量分析的試劑通常分為兩類(lèi)：一類(lèi)是間接檢測(cè)法，即檢測(cè)與蛋白螯合后被還原銅離子；另一類(lèi)是直接檢測(cè)法，即使用與蛋白結(jié)合的染料，檢測(cè)樣品中顏色的變化。Thermo Scientific BCA和改良Lowry法蛋白定量分析是基于銅離子螯合。ThermoScientific 660納米和考馬斯（Bradford）蛋白定量分析是基于染料結(jié)合的方法。這些試劑都是熟悉的、穩(wěn)定的方法，并且能夠提供一致可靠的結(jié)果。總體而言，這些方法代表了目前比色法檢測(cè)和總蛋白定量的技術(shù)水平。
一.蛋白定量分析方法的選擇
為了盡量方便和實(shí)用，蛋白定量分析方法不會(huì)只特異地針對(duì)蛋白（即不受任何非蛋白組分的影響）或?qū)λ蟹N類(lèi)的蛋白一樣靈敏（即不受蛋白組分差異的影響），所以，成功地使用蛋白定量分析試劑包括選擇最適合待測(cè)樣品的分析方法，選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)品以及了解和控制方法的局限性。
當(dāng)需要測(cè)定樣品中的總蛋白濃度時(shí)，必須首先選擇合適的蛋白定量分析方法。在眾多可供選擇的蛋白定量分析試劑中選擇合適的試劑通？紤]的是所用方法與待測(cè)樣本的兼容性。目的是為了選擇一種測(cè)定方法，讓使用者對(duì)含有干擾物的樣本進(jìn)行最少的操作和預(yù)處理。每種方法都有各自的優(yōu)缺點(diǎn)。因?yàn)闆](méi)有一種試劑可以在所有的環(huán)境下都能最好地測(cè)定蛋白，大部分研究者在他們的實(shí)驗(yàn)室里都有多種蛋白定量分析試劑。我們的BCA蛋白定量分析試劑盒和考馬斯（Bradford）蛋白定量分析試劑盒可以互為補(bǔ)充，同時(shí)為大多數(shù)樣品提供了兩種基本的測(cè)定方法。各種輔助試劑和這兩種分析方法的改良版本適于特殊樣品的需求。
二.蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的選擇
參考標(biāo)準(zhǔn)品的最佳選擇是一種純的，已知濃度的，在樣品中占優(yōu)勢(shì)數(shù)量的蛋白。但是通常情況下這是不可能的也并不必要；很多實(shí)驗(yàn)所需要的只是估計(jì)一下樣品中的總蛋白濃度。如果感興趣蛋白的高純品不能獲得或者用它來(lái)作標(biāo)準(zhǔn)品太過(guò)昂貴，替代的方法是選擇一種蛋白，該蛋白需要在所選擇的蛋白定量分析實(shí)驗(yàn)中會(huì)產(chǎn)生非常相似的顏色反應(yīng)曲線并且在任何時(shí)間任何實(shí)驗(yàn)室都可以隨時(shí)使用。對(duì)于日常的蛋白定量分析工作，牛血清白蛋白（BSA）由于其高純度、容易獲得及相對(duì)便宜的價(jià)格等特性成為很好的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品。雖然牛gamma球蛋白（BGG）包含了幾種免疫球蛋白的混合物，但是因?yàn)锽GG產(chǎn)生的顏色反應(yīng)曲線與免疫球蛋白（IgG）的曲線非常相似，所以在當(dāng)測(cè)定抗體濃度時(shí)牛gamma球蛋白也是一個(gè)好的標(biāo)準(zhǔn)品。
Thermo Scientific蛋白定量分析試劑盒與試劑指南