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血清使用常見問題和解決方法

發(fā)布人:浩然生物 瀏覽 9682次【字號 】 發(fā)布時間:2011年06月03日 打印本頁

1.如何解凍血清才不會使產(chǎn)品品質(zhì)受損?
我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。
2.保存血清最好的方法?
我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
3.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的品質(zhì)。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
4.為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補體系統(tǒng)。啟動的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,啟動淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。
5.有必要做熱滅活嗎?
實驗顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的品質(zhì),而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37 ℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。 因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節(jié)省您寶貴的時間,更確保血清的品質(zhì)!
6.為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現(xiàn)沉淀?
GIBICO的胎牛血清沒有預(yù)老化,儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會影響血清的品質(zhì)。推薦在-20℃儲存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。
7.如何避免沉淀物的產(chǎn)生?
我們建議您在使用血清的時候,注意下列的操作:
•解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度 
太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
•解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
•請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的品質(zhì)。
•血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
•若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多


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