應(yīng)用程序精確,快速,簡(jiǎn)單的技術(shù)檢測(cè)和定量細(xì)胞凋亡片段在單細(xì)胞水平的細(xì)胞和組織與紅色熒光標(biāo)記的熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀。
效益
•方便:不需要二次檢測(cè)系統(tǒng)
•準(zhǔn)確:鑒定細(xì)胞凋亡在分子水平上(DNA鏈斷裂)和鑒定細(xì)胞在非常早期階段的細(xì)胞凋亡
•靈活:屯門(mén)公路紅允許二次標(biāo)記,例如,熒光標(biāo)記的細(xì)胞標(biāo)記
產(chǎn)品說(shuō)明
材料:懸浮細(xì)胞,細(xì)胞離心涂片和細(xì)胞涂片的籌備工作,貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)的幻燈片,和冷凍和石蠟切片。
背景信息
廣泛使用的方法,以確定細(xì)胞凋亡,包括分析的基因組DNA瓊脂糖凝膠電泳和DNA斷裂分析為基礎(chǔ)的3H -胸腺嘧啶和,另外,5-bromo-2'2 '脫氧尿苷。該方法包括分離低分子量的碎片,不分段,分子量高的基因在特定細(xì)胞群體。因此,這些方法不提供資料的命運(yùn)單個(gè)細(xì)胞在特定細(xì)胞群體,或特別,在組織切片。另外,個(gè)別細(xì)胞凋亡可能是微觀認(rèn)識(shí)因?yàn)橥庥^特征的核染色質(zhì)凝聚和分裂,但這種方法是主觀的和不限于一個(gè)相對(duì)狹窄的時(shí)間窗口時(shí)的形態(tài)變化是最大的一個(gè)。
標(biāo)志的細(xì)胞凋亡是脫氧核糖核酸的降解,而在早期階段,是有選擇性的internucleosomal基因連接區(qū)域。該裂解會(huì)產(chǎn)生雙鏈和單鏈斷裂(女)。這兩種類(lèi)型的休息可以檢測(cè)到標(biāo)簽的自由3’-哦總站修改核苷酸(例如,biotin-dutp,dig-dutp,fluorescein-dutp)的酶促反應(yīng)。末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(酶)催化模板獨(dú)立聚合脫氧核糖核苷酸的3 '端的單和雙鏈脫氧核糖核酸。這種方法也被稱(chēng)為凋亡(公司dutp-x缺口末端標(biāo)記)。另外,免費(fèi)3' -羥基可以標(biāo)記使用聚合酶的模板依賴(lài)機(jī)制稱(chēng)為缺口翻譯。然而,該方法被認(rèn)為是更敏感和更快。
內(nèi)容
1。酶解(酶),5瓶
2。標(biāo)簽解決方案(tmr-dutp),5瓶
注:凋亡反應(yīng)混合物制備的混合酶液和標(biāo)簽解決方案之前,使用。