應用程序定性檢測細胞凋亡在單細胞水平的光鏡。
效益
•敏感:最大強度的標記(細胞染色)細胞凋亡高于缺口翻譯法
•快速:使用fluorescein-dutp可以分析樣品后直接的凋亡反應,但在另外的二次檢測系統(tǒng)
•方便:直接標記程序使用fluorescein-dutp允許核查效率的凋亡反應,在檢測程序
•準確:鑒定細胞凋亡在分子水平上(DNA鏈斷裂)和鑒定細胞在非常早期階段的細胞凋亡
•靈活:不包括基板;提供選擇的機會的染色程序的選擇
產(chǎn)品說明
材料:離心涂片和細胞涂片的籌備工作,貼壁細胞生長的幻燈片,和冷凍和石蠟切片。
背景信息
廣泛使用的方法,以確定細胞凋亡,包括分析的基因組DNA瓊脂糖凝膠電泳和DNA斷裂分析為基礎(chǔ)的3H -胸腺嘧啶和,另外,5-bromo-2'2 '脫氧尿苷。該方法包括分離低分子量的碎片,不分段,高分子量的基因在特定細胞群體。因此,這些方法不提供資料的命運單個細胞在特定細胞群體,特別是,在組織切片。另外,個別細胞凋亡可能是微觀認識因為外觀特征的核染色質(zhì)凝聚和分裂,但這種方法是主觀的和不限于一個相對狹窄的時間窗口時的形態(tài)變化是最大的一個。
標志的細胞凋亡是降解,而在早期階段是有選擇性的internucleosomal基因連接區(qū)域。該裂解會產(chǎn)生雙鏈和單鏈斷裂(女)。這兩種類型的休息可以檢測到標簽的自由3’-哦總站修改核苷酸(例如,biotin-dutp,dig-dutp,fluorescein-dutp)的酶促反應。末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(酶)催化模板獨立聚合脫氧核糖核苷酸的3 '端的單和雙鏈脫氧核糖核酸。這種方法也被稱為凋亡(公司dutp-x缺口末端標記)。另外,免費3' -羥基可以標記使用聚合酶的模板依賴機制稱為缺口翻譯。然而,該方法被認為是更敏感和更快。
內(nèi)容
1。酶解(酶),5瓶
2。標簽解決方案(fluorescein-dutp),5瓶
3。轉(zhuǎn)換器吊艙(反熒光antibody-pod),隨時可以使用