應(yīng)用程序定性檢測細(xì)胞凋亡在單細(xì)胞水平的光鏡。
效益
敏感:最大強(qiáng)度的標(biāo)記(細(xì)胞染色)細(xì)胞凋亡高于缺口翻譯法
快速:使用fluorescein-dutp可以分析樣品后直接的凋亡反應(yīng),但在另外的二次檢測系統(tǒng)
方便:直接標(biāo)記程序使用fluorescein-dutp允許核查效率的凋亡反應(yīng),在檢測程序
準(zhǔn)確:鑒定細(xì)胞凋亡在分子水平上(DNA鏈斷裂)和鑒定細(xì)胞在非常早期階段的細(xì)胞凋亡
靈活:不包括基板;提供選擇的機(jī)會的染色程序的選擇
產(chǎn)品說明
材料:離心涂片和細(xì)胞涂片的籌備工作,貼壁細(xì)胞生長的幻燈片,和冷凍和石蠟切片。
背景信息
廣泛使用的方法,以確定細(xì)胞凋亡,包括分析的基因組DNA瓊脂糖凝膠電泳和DNA斷裂分析為基礎(chǔ)的3H -胸腺嘧啶和,另外,5-bromo-2'2 '脫氧尿苷。該方法包括分離低分子量的碎片,不分段,高分子量的基因在特定細(xì)胞群體。因此,這些方法不提供資料的命運(yùn)單個(gè)細(xì)胞在特定細(xì)胞群體,特別是,在組織切片。另外,個(gè)別細(xì)胞凋亡可能是微觀認(rèn)識因?yàn)橥庥^特征的核染色質(zhì)凝聚和分裂,但這種方法是主觀的和不限于一個(gè)相對狹窄的時(shí)間窗口時(shí)的形態(tài)變化是最大的一個(gè)。
標(biāo)志的細(xì)胞凋亡是降解,而在早期階段是有選擇性的internucleosomal基因連接區(qū)域。該裂解會產(chǎn)生雙鏈和單鏈斷裂(女)。這兩種類型的休息可以檢測到標(biāo)簽的自由3’-哦總站修改核苷酸(例如,biotin-dutp,dig-dutp,fluorescein-dutp)的酶促反應(yīng)。末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(酶)催化模板獨(dú)立聚合脫氧核糖核苷酸的3 '端的單和雙鏈脫氧核糖核酸。這種方法也被稱為凋亡(公司dutp-x缺口末端標(biāo)記)。另外,免費(fèi)3' -羥基可以標(biāo)記使用聚合酶的模板依賴機(jī)制稱為缺口翻譯。然而,該方法被認(rèn)為是更敏感和更快。
內(nèi)容
酶解(酶),5瓶
標(biāo)簽解決方案(fluorescein-dutp),5瓶
轉(zhuǎn)換器美聯(lián)社(反熒光antibody-ap),隨時(shí)可以使用