產品描述:
Cyclopamine是一種特異性的Hedgehog (Hh)信號通路拮抗劑，作用于Smoothened (Smo)，IC50為46 nM。
靶點 Smoothened (SMO)     
IC50 46 nM [1]     
體外研究:
Cyclopamine 抑制Hedgehog信號通路， IC50 為46 nM, 且在[3H]Hh-Ag結合實驗中，作用于CHO-K1細胞，抑制人類Smo受體活性，IC50為 280 nM。[1] Cyclopamine作用于表達Patched (PTCH) mRNA的腸源性腫瘤細胞，顯著抑制 Hedgehog通路活性，這種作用存在劑量依賴性，且濃度為3 μM時，抑制腫瘤細胞生長，抑制達75-95%, 但是作用于不表達PTCH mRNA的結腸癌細胞沒有效果，說明Cyclopamine 特定作用于Hedgehog 通路，且沒有毒性。[2]通過與Smo直接作用而抑制Hedgehog信號，Cyclopamine (10 μM) 抑制SMOhigh Cyclopamine-反應細胞系L3.6sl和 Panc 05.04增殖，抑制達 75-80%,且使凋亡率提高2.5到 3.5倍，但是不影響B(tài)xPC3-SMOlow 細胞系。[3] Cyclopamine 處理E3LZ10.7細胞系，顯著降低Snail mRNA，且提供E-鈣粘著蛋白轉錄。Cyclopamine處理Hedgehog依賴型 L3.6pl 細胞，顯著抑制浸潤型細胞, 使轉移細胞降低500多倍，但是對Hedgehog非依賴性細胞系Panc-1沒有影響。[4]
研究:
Cyclopamine 每天按50 mg/kg劑量處理小鼠，持續(xù)22天，消除HUCCT1移植瘤，且沒有明顯副作用。[2] Cyclopamine 按1.2 mg劑量處理Panc 05.04和 L3.6sl驅動的腫瘤7天，前者誘導明顯的腫瘤細胞凋亡，后者降低腫瘤質量，降低達50-60%，但是作用于BxPC3-SMOlow腫瘤沒有效果。[3] Cyclopamine單獨處理E3LZ10.7 和L3.6pl移植瘤，顯著抑制腫瘤轉移，且和 Gemcitabine聯(lián)用處理，完全廢除轉移。[4]
激酶實驗 Gli-Luc實驗測定Hh 信號通路末期, 即使用熒光素酶進行讀數(shù)，測定Gli的轉錄調控。Cyclopamine 在DMSO中連續(xù)稀釋用于實驗，然后加到空的實驗板上。TM3Hh12 細胞(TM3 細胞含Hh反應受體基因結構 pTA-8xGli-Luc) 懸浮在含5% FBS 和15 mM Hepes pH 7.3的F12 Ham’s/DMEM (1:1)培養(yǎng)基上, 加到實驗板上，與Cyclopamine在37oC下溫育30分鐘左右。1 nM Hh-Ag 1.5 加到實驗板上，然后在37oC下溫育。48小時后，在實驗板中加入Bright-Glo或MTS，然后在492 nm處測定發(fā)光度或吸光度。通過分析反應曲線，使用R統(tǒng)計軟件包測定IC50值。
細胞試驗: [2]
細胞系 SEG1, OE33, KYAE, KYSE180, SNU1, AGS, SNU16, NCI-N-87, HUCCT1, PANC1, PL5, PL6, BXPC3, HS766T, KYSE150, GBD1, DLD1, 和HCT116
濃度:溶于DMSO, 終濃度為3 μM
處理時間:4天
方法:
在96孔板上，用Cyclopamine 處理細胞。通過MTS實驗測定細胞活力。進行CellTiter96比色測定，進行2和4天，然后在490 nm處通過測定光密度而測定存活細胞。
動物實驗: [2]
動物模型:皮下注射HUCCT1細胞的無胸腺裸鼠
配制:溶于DMSO, 然后用鹽水稀釋
劑量:50 mg/kg/day
給藥處理:皮下注射處理
溶解度:1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80, 30 mg/mL

貨號	品名	產地	規(guī)格	價格
C-8700	Cyclopamine環(huán)巴胺	LC	5MG	1450